介绍下Rh系统血型鉴定的方法及操作

医学2020-08-23 20:08:55
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红细胞Rh表型可用特殊的具有抗D、C、c、E和e抗血清检测来鉴定。虽然Rh血型系统中有许多种抗原,但常规只用抗D血清检查有无D抗原。当有特殊需要如家系调查、父权鉴定、配血不合等情况时才需用抗C、抗c、抗E、抗e等标准血清做全部表型测定。Rh抗体属IgG,不能在盐水介质中与红细胞发生凝集,因此必须采用以下几种鉴定方法:

1.低离子强度盐水试验:可提高抗D抗体与D阳性红细胞结合率,并提高其灵敏度。

2.酶介质法:木瓜酶或菠萝酶可以破坏红细胞表面的唾液酸,使红细胞膜失去电荷,缩小红细胞间的距离;同时酶还可以部分地改变红细胞表面结构,使某些隐蔽的抗原得以暴露,增强凝集性;且对IgG的作用大于IgM,故有利于检出不完全抗体。

(1)试剂:IgG型抗D标准血清、1%木瓜酶(或菠萝蛋白酶)溶液、5%D阳性红细胞生理盐水悬液、5%D阴性红细胞生理盐水悬液。

(2)注意事项:

①Rh血型系统的抗体多由获得性免疫产生,血清中很少有天然抗体,故不需要做反定型。

②对照:酶易失活,故每次试验都要设置阳性对照。若阳性对照不出现凝集,表明酶或抗血清已经失效。酶活性过强出现假阳性结果,因而要设立阴性对照,以排除假阳性。只有在阳性对照管出现凝集而阴性对照管不凝集的情况下,才说明被检管的结果是可靠的。

③结果阴性:说明被检红细胞上无相应抗原,但由于DU抗原性弱,因此,如被检者无凝集,还应进一步检查以排除DU的可能。

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