共聚焦显微镜对脑肿瘤光动力学诊断的亮点分析

使用5-氨基乙酰丙酸(5-ALA)的光动力学诊断现在广泛用于脑肿瘤的神经外科切除术。区分肿瘤与健康组织是基于在胶质瘤细胞中比在非癌细胞中更大的5-ALA衍生的原卟啉IX积累，当在405nm激发时导致更大的红色荧光(在635nm处的峰)。然而，由于荧光边界通常是模糊的，因此仍难以精确地区分肿瘤边缘和浸润区域与非肿瘤组织。在我们之前的研究中，我们注意到共聚焦显微镜图像中的亮点可能能够将肿瘤与正常组织区分开来。

[方法]

对从5-ALA处理的患者切除的脑肿瘤组织进行切片以评估由544.5-619.5nm波长带通滤波器捕获的亮点，其在共聚焦显微镜下消除由5-ALA诱导的荧光。观察到边界区域和邻近的正常组织。进行病理学检查以通过相同样品的连续切片的苏木精和曙红(H&E)染色来确认肿瘤，浸润肿瘤细胞和正常组织区域的位置。在用于病理检查的相同区域中测量亮点区域。该方法适用于有和没有红色荧光的脑肿瘤以及胶质母细胞瘤(GBM)和非GBM脑肿瘤。

[结果]

GBM肿瘤中的亮点区域明显小于正常脑组织。渗透肿瘤的边缘也比边缘的正常组织小。在没有红色荧光的肿瘤组织和非GBM肿瘤中观察到相同的亮点模式。已经提出亮斑荧光基于发射光谱(主要在544.5-619.5nm内)和最佳激发波长(约405nm)从脂褐素衍生。

[意义和未来前景]

亮点分析有助于在使用5-ALA的光动力学诊断中促进浸润性肿瘤与边界正常组织的区分。该方法也可用于没有5-ALA衍生的红色荧光和非GBM肿瘤的肿瘤。应进一步研究肿瘤中亮点荧光减少的机制及其在脑肿瘤精确鉴别中的应用。

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